簡介
 

　　古語說：“工欲善其事無障礙，必先利其器”。要想很好地應(yīng)用流式細(xì)胞分析和分選技術(shù)提供堅實支撐，必需先對儀器進(jìn)行調(diào)試競爭力，使其處于良好的工作狀態(tài)，并能正確使用儀器創新能力。下面簡要介紹細(xì)胞計的調(diào)試項目及要點進行部署、使用的程序等等緊密相關。
 

　　調(diào)試和校準(zhǔn)
 

　　流式細(xì)胞儀在使用前逐步顯現，甚至在使用過程中都要精心進(jìn)行調(diào)試作用，以保證工作的可靠性。調(diào)試的項目主要是激光強(qiáng)度近年來、液流速度和測量區(qū)的光路等銘記囑托。
 

　　激光強(qiáng)度：除調(diào)整反射鏡的角度以調(diào)整到所需波長的激光出光外，還要結(jié)合顯示屏上的光譜曲線使激光的強(qiáng)度輸出為大交流等。
 

　　液流速度：可通過操作臺數(shù)字顯示監(jiān)督製造業，調(diào)節(jié)　氣體壓力大小以獲得穩(wěn)定的液流速度。
 

　　測量區(qū)光路調(diào)節(jié)∽詣踊b置。哼@是調(diào)試工作的關(guān)鍵狀態。需要保證在測量區(qū)的液流、激光束關規定、90散射測量光電系統(tǒng)垂直正交更多的合作機會，而且交點較小。一般可在用標(biāo)準(zhǔn)熒光微球等校準(zhǔn)中完成穩定發展。
 

　　流式細(xì)胞術(shù)中所測得的量是相對值方便，因此需要在使用前或使用中對系統(tǒng)進(jìn)行校準(zhǔn)或標(biāo)定明顯，這樣才能通過相對測量獲得的意義更好。因而FCM中的校準(zhǔn)具有雙重功能：儀器的準(zhǔn)直調(diào)整和定量標(biāo)度幅度。標(biāo)準(zhǔn)樣品應(yīng)該穩(wěn)定，有形成份形狀應(yīng)是大小比較一致球形效高性，樣品分散性能良好各有優勢，且經(jīng)濟(jì)、容易獲得重要的作用。常用標(biāo)準(zhǔn)熒光微球作為非生物學(xué)標(biāo)準(zhǔn)樣品資料，雞血紅細(xì)胞做為生物學(xué)標(biāo)準(zhǔn)樣品。微球用樹脂材料制作重要的意義，或標(biāo)有熒光素集成，或不標(biāo)記熒光素。所用的雞血紅細(xì)胞標(biāo)準(zhǔn)樣品制作過程昭下：取3.8%枸櫞酸或肝素抗凝的雞血(抗凝劑：雞血=1：4)關註度，經(jīng)PBS清洗3次，再用5～10ml的1.0%戊二醛與清洗后的雞紅細(xì)胞混合，室溫下振蕩醛化24h穩中求進，后經(jīng)PBS再清洗橫向協同，貯4℃冰箱中備用。需要指出的是因為未經(jīng)熒光染色再獲，所測光信號為雞血紅蛋白的自發(fā)熒光穩定性。
 

　　儀器的操作和使用
 

　　①打開電源敢於挑戰，對系統(tǒng)進(jìn)行預(yù)熱資源優勢；
 

　　②打開氣體閾過程中，調(diào)節(jié)　壓力堅實基礎，獲得適宜的液流速度；開啟光源冷卻系統(tǒng)大數據；
 

　∏熬?、墼跇悠饭苤屑尤肴ルx子水，沖洗液流的噴嘴系統(tǒng)；
 

　￠L效機製、芾眯?zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)樣品，調(diào)整儀器重要部署，使在激光功率等地、光電倍增管電壓、放大器電路增益調(diào)定的基礎(chǔ)上責任製，0和90散射的熒光強(qiáng)度效率，并要求變異系數(shù)為小；
 

　≡鰪?、葸x定流速倍增效應、測量細(xì)胞數(shù)、測量參數(shù)等戰略布局，在同樣的工作條件下測量樣品和對照樣品重要意義；同時選擇計算機(jī)屏上數(shù)據(jù)的顯示方式，從而能直觀掌握測量進(jìn)程講道理；
 

　∫I、迾悠窚y量完畢后，再用去離子水沖洗液流系統(tǒng)更加廣闊；
 

　灮詹呗?、咭驗閷嶒灁?shù)據(jù)已存入計算機(jī)硬盤(有的機(jī)器還備有光盤系統(tǒng)，存貯量更大)示範，因此可關(guān)閉氣體規模、測量裝置，而單獨使用計算機(jī)進(jìn)行數(shù)據(jù)處理新格局；
 

　∽饔?、鄬⑺杞Y(jié)果打印出來。
 

　　操作和使用中的注意事項
 

　　1)光電倍增管要求穩(wěn)定的工作條件特點，暴露的較強(qiáng)的光線下以后，需要較長時間的“暗適應(yīng)”以消除或降低部分暗電流本底才能工作；另外還要注意磁屏蔽製度保障；
 

　　2)光源不得在短時間內(nèi)(一般要1h左右)關(guān)上又打開聯動；使用光源必須預(yù)熱并注意冷卻系統(tǒng)工作是否正常；
 

　　3)液流系統(tǒng)必需隨時保持液流暢通顯示，避免氣泡栓塞技術特點，所使用的鞘流液使用前要經(jīng)過過濾、消毒共同努力；
 

　　4)注意根據(jù)測量對象的變換選用合適的濾片系統(tǒng)保持競爭優勢、放大器的類型等；
 

　　5)特別強(qiáng)調(diào)每次測量都需要對照組發展邏輯。