簡介
 

　　古語說：“工欲善其事問題，必先利其器”。要想很好地應(yīng)用流式細(xì)胞分析和分選技術(shù)，必需先對儀器進(jìn)行調(diào)試，使其處于良好的工作狀態(tài)，并能正確使用儀器顯著。下面簡要介紹細(xì)胞計的調(diào)試項(xiàng)目及要點(diǎn)、使用的程序等等。
 

　　調(diào)試和校準(zhǔn)
 

　　流式細(xì)胞儀在使用前創新能力，甚至在使用過程中都要精心進(jìn)行調(diào)試，以保證工作的可靠性範圍。調(diào)試的項(xiàng)目主要是激光強(qiáng)度求得平衡、液流速度和測量區(qū)的光路等。
 

　　激光強(qiáng)度：除調(diào)整反射鏡的角度以調(diào)整到所需波長的激光出光外空間廣闊，還要結(jié)合顯示屏上的光譜曲線使激光的強(qiáng)度輸出為大至關重要。
 

　　液流速度：可通過操作臺數(shù)字顯示監(jiān)督提供深度撮合服務，調(diào)節(jié)　氣體壓力大小以獲得穩(wěn)定的液流速度。
 

　　測量區(qū)光路調(diào)節(jié)〉陌l生。哼@是調(diào)試工作的關(guān)鍵組成部分。需要保證在測量區(qū)的液流、激光束新的動力、90散射測量光電系統(tǒng)垂直正交的過程中，而且交點(diǎn)較小。一般可在用標(biāo)準(zhǔn)熒光微球等校準(zhǔn)中完成廣泛關註。
 

　　流式細(xì)胞術(shù)中所測得的量是相對值促進進步，因此需要在使用前或使用中對系統(tǒng)進(jìn)行校準(zhǔn)或標(biāo)定，這樣才能通過相對測量獲得的意義鍛造。因而FCM中的校準(zhǔn)具有雙重功能：儀器的準(zhǔn)直調(diào)整和定量標(biāo)度競爭激烈。標(biāo)準(zhǔn)樣品應(yīng)該穩(wěn)定，有形成份形狀應(yīng)是大小比較一致球形改善，樣品分散性能良好空白區，且經(jīng)濟(jì)、容易獲得信息化。常用標(biāo)準(zhǔn)熒光微球作為非生物學(xué)標(biāo)準(zhǔn)樣品形勢，雞血紅細(xì)胞做為生物學(xué)標(biāo)準(zhǔn)樣品。微球用樹脂材料制作取得明顯成效，或標(biāo)有熒光素約定管轄，或不標(biāo)記熒光素。所用的雞血紅細(xì)胞標(biāo)準(zhǔn)樣品制作過程昭下：取3.8%枸櫞酸或肝素抗凝的雞血(抗凝劑：雞血=1：4)創新的技術，經(jīng)PBS清洗3次發揮，再用5～10ml的1.0%戊二醛與清洗后的雞紅細(xì)胞混合，室溫下振蕩醛化24h快速增長，后經(jīng)PBS再清洗開放以來，貯4℃冰箱中備用。需要指出的是因?yàn)槲唇?jīng)熒光染色初步建立，所測光信號為雞血紅蛋白的自發(fā)熒光綜合運用。
 

　　儀器的操作和使用
 

　　①打開電源的方法，對系統(tǒng)進(jìn)行預(yù)熱實事求是；
 

　　②打開氣體閾落到實處，調(diào)節(jié)　壓力服務水平，獲得適宜的液流速度；開啟光源冷卻系統(tǒng)技術創新；
 

　脭U展、墼跇悠饭苤屑尤肴ルx子水體驗區，沖洗液流的噴嘴系統(tǒng)；
 

　』顒由?、芾眯?zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)樣品有望，調(diào)整儀器，使在激光功率導向作用、光電倍增管電壓方案、放大器電路增益調(diào)定的基礎(chǔ)上，0和90散射的熒光強(qiáng)度十大行動，并要求變異系數(shù)為凶笥?。?br /> 

　【C合措施、葸x定流速可靠保障、測量細(xì)胞數(shù)、測量參數(shù)等設計標準，在同樣的工作條件下測量樣品和對照樣品開展；同時選擇計算機(jī)屏上數(shù)據(jù)的顯示方式，從而能直觀掌握測量進(jìn)程發揮重要帶動作用；
 

　∫庀?、迾悠窚y量完畢后，再用去離子水沖洗液流系統(tǒng)文化價值；
 

　⌒问?、咭?yàn)閷?shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)已存入計算機(jī)硬盤(有的機(jī)器還備有光盤系統(tǒng)，存貯量更大)不斷完善，因此可關(guān)閉氣體足了準備、測量裝置，而單獨(dú)使用計算機(jī)進(jìn)行數(shù)據(jù)處理著力提升；
 

　∩羁虄群?、鄬⑺杞Y(jié)果打印出來。
 

　　操作和使用中的注意事項(xiàng)
 

　　1)光電倍增管要求穩(wěn)定的工作條件重要意義，暴露的較強(qiáng)的光線下以后，需要較長時間的“暗適應(yīng)”以消除或降低部分暗電流本底才能工作更加廣闊；另外還要注意磁屏蔽規劃；
 

　　2)光源不得在短時間內(nèi)(一般要1h左右)關(guān)上又打開；使用光源必須預(yù)熱并注意冷卻系統(tǒng)工作是否正常可以使用；
 

　　3)液流系統(tǒng)必需隨時保持液流暢通進入當下，避免氣泡栓塞，所使用的鞘流液使用前要經(jīng)過過濾效高化、消毒新體系；
 

　　4)注意根據(jù)測量對象的變換選用合適的濾片系統(tǒng)投入力度、放大器的類型等；
 

　　5)特別強(qiáng)調(diào)每次測量都需要對照組不難發現。