BD 流式細胞儀的工作原理是:將待測細胞經(jīng)特異性熒光染料染色后放入樣品管中交流,在氣體的壓力下進入充滿鞘液的流動室。在鞘液的約束下細胞排成單列由流動室的噴嘴噴出更高要求,形成細胞柱高效利用。
BD 流式細胞儀通常以激光作為發(fā)光源。經(jīng)過聚焦整形后的光束不要畏懼,垂直照射在樣品流上導向作用,被熒光染色的細胞在激光束的照射下,產(chǎn)生散射光和激發(fā)熒光作用。
這兩種信號同時被前向光電二極管和90°方向的光電倍增管接收重要意義。光散射信號在前向小角度進行檢測,這種信號基本上反映了細胞體積的大小;熒光信號的接受方向與激光束垂直應用的選擇,經(jīng)過一系列雙色性反射鏡和帶通濾光片的分離效率,形成多個不同波長的熒光信號。
這些熒光信號的強度代表了所測細胞膜表面抗原的強度或其核內(nèi)物質(zhì)的濃度大大縮短,經(jīng)光電倍增管接收后可轉換為電信號堅持好,再通過模/數(shù)轉換器,將連續(xù)的電信號轉換為可被計算機識別的數(shù)字信號高質量。
計算機把所測量到的各種信號進行計算機處理構建,將分析結果顯示在計算機屏幕上,也可以打印出來大幅增加,還可以數(shù)據(jù)文件的形式存儲在硬盤上以備日后的查詢或進一步分析平臺建設。
檢測數(shù)據(jù)的顯示視測量參數(shù)的不同由多種形式可供選擇。單參數(shù)數(shù)據(jù)以直方圖的形式表達服務延伸,其X軸為測量強度先進技術,Y軸為細胞數(shù)目。
一般來說貢獻力量,BD 流式細胞儀坐標軸的分辨率有512或1024通道數(shù)合作,這視其模數(shù)轉換器的分辨率而定。對于雙參數(shù)或多參數(shù)數(shù)據(jù)前景,既可以單獨顯示每個參數(shù)的直方圖,也可以選擇二維的三點圖、等高線圖進一步、灰度圖或三維立體視圖宣講手段。
細胞的分選是通過分離含有單細胞的液滴而實現(xiàn)的。在流動室的噴口上配有一個超高頻電晶體發行速度,充電后振動極致用戶體驗,使噴出的液流斷裂為均勻的液滴,待測定細胞就分散在這些液滴之中積極拓展新的領域。
將這些液滴充以正負不同的電荷充分發揮,當液滴流經(jīng)帶有幾千伏特的偏轉板時技術,在高壓電場的作用下偏轉,落入各自的收集容器中,不予充電的液滴落入中間的廢液容器有所提升,從而實現(xiàn)細胞的分離。對分選出的細胞可以進行培養(yǎng)或其它處理參與能力,做更深的研究。