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神經(jīng)干細胞利用微重力三維細胞培養(yǎng)系統(tǒng)培養(yǎng)方案

更新時間:2025-03-28瀏覽:469次

1. 前期準備

 

- 實驗材料:獲取神經(jīng)干細胞(如從胚胎腦組織分離)總之、微重力模擬裝置置之不顧、神經(jīng)干細胞專用培養(yǎng)基(含 B27 添加劑、EGF提升行動、bFGF DMEM/F12 培養(yǎng)基)全面協議、多聚賴氨酸包被的培養(yǎng)容器重要部署、無菌器械等。

 

- 設(shè)備準備:與腫瘤細胞培養(yǎng)類似工具,調(diào)試賽奧維度CellSpace-3D微重力三維細胞培養(yǎng)系統(tǒng)智慧與合力,確保溫度、氣體環(huán)境適宜廣泛關註。

 

2. 細胞分離與接種

 

- 細胞分離:解剖獲取胚胎腦組織促進進步,在無菌條件下剪碎,用胰蛋白酶消化后優勢領先,通過機械吹打制成單細胞懸液迎來新的篇章,過濾去除組織塊,離心收集細胞推動並實現。

 

- 接種:將神經(jīng)干細胞以 2 - 3×10? /mL 的密度接種到微重力培養(yǎng)裝置中薄弱點,因神經(jīng)干細胞易貼壁,包被多聚賴氨酸可促進貼壁。

 

3. 培養(yǎng)過程

 

- 2 - 3 天添加適量新鮮培養(yǎng)基重要性,維持營養(yǎng)成分又進了一步。觀察細胞神經(jīng)球形成情況,神經(jīng)球直徑達到一定大小時多元化服務體系,可進行傳代培養(yǎng)規劃。

 

- 采用免疫熒光技術(shù)檢測神經(jīng)干細胞標志物(如 Nestin)的表達,以鑒定細胞特性深度。

 

4. 誘導分化:培養(yǎng)一定時間后帶動擴大,可更換為含血清的分化培養(yǎng)基,在微重力環(huán)境下誘導神經(jīng)干細胞向神經(jīng)元開拓創新、星形膠質(zhì)細胞等分化持續發展,通過免疫細胞化學檢測相應(yīng)細胞標志物(如 β - Tubulin III 用于神經(jīng)元,GFAP 用于星形膠質(zhì)細胞)評估分化效果促進善治。

 


 

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