BD 流式細(xì)胞儀是集激光技術(shù)逐步顯現、電子物理、光電測量、計(jì)算機(jī)及細(xì)胞熒光化學(xué)技術(shù)于一體的多參數(shù)細(xì)胞分析儀器近年來,廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)研究和臨床診斷領(lǐng)域。其核心功能是通過液流系統(tǒng)將細(xì)胞或微粒排列成單列事關全面,依次通過激光束檢測點(diǎn)交流等,利用光學(xué)系統(tǒng)激發(fā)熒光標(biāo)記物并捕獲散射光與熒光信號,最終通過電子系統(tǒng)將光信號轉(zhuǎn)換為數(shù)字信號進(jìn)行多維度分析發展目標奮鬥。
其液流系統(tǒng)由鞘液管自動化裝置、樣品管和噴嘴組成,通過流體動(dòng)力學(xué)聚焦使細(xì)胞懸浮液形成直徑約3-10μm的穩(wěn)定液柱更優質,確保每個(gè)細(xì)胞獨(dú)立通過激光檢測區(qū)成就。光學(xué)系統(tǒng)采用氬離子激光器(488nm)或氪離子激光器(647nm),激發(fā)細(xì)胞表面或內(nèi)部的熒光染料(如FITC方案、PE)多種方式。前向散射光(FSC)反映細(xì)胞體積,側(cè)向散射光(SSC)揭示胞內(nèi)顆粒結(jié)構(gòu)實施體系,而熒光信號強(qiáng)度則對應(yīng)標(biāo)記抗原或核酸的濃度。光電倍增管(PMT)將光信號轉(zhuǎn)換為電脈沖幅度,經(jīng)模數(shù)轉(zhuǎn)換后生成FCS格式數(shù)據(jù)文件技術創新。
BD 流式細(xì)胞儀的技術(shù)特點(diǎn):
1、高通量檢測
高速分析:檢測速度可達(dá)每秒數(shù)千至上萬個(gè)細(xì)胞各有優勢,適用于大規(guī)模樣本篩查(如血液免疫細(xì)胞分析技術發展、腫瘤細(xì)胞分型)。
高效數(shù)據(jù)處理:支持短時(shí)間內(nèi)處理大量細(xì)胞(如百萬級細(xì)胞)資料,滿足臨床診斷和藥物篩選的需求自動化。
2、多參數(shù)同步分析
多色熒光檢測:配備多波長激光(如488nm集成、633nm等)和多通道熒光檢測器規模最大,可同時(shí)檢測3~30+種熒光標(biāo)記參數(shù)(如FITC關註度、PE、APC等)重要手段,結(jié)合散射光參數(shù)(FSC/SSC)穩中求進,實(shí)現(xiàn)單細(xì)胞層面的多維特征分析。
信息維度豐富:可同步檢測細(xì)胞表面抗原不折不扣、胞內(nèi)細(xì)胞因子再獲、DNA含量、活性氧(ROS)等指標(biāo)最深厚的底氣,揭示細(xì)胞功能與狀態(tài)的關(guān)聯(lián)性敢於挑戰。
3、單細(xì)胞分辨率
個(gè)體化分析:以單細(xì)胞為檢測單位應用擴展,直接反映細(xì)胞間的異質(zhì)性過程中,避免群體平均化掩蓋關(guān)鍵信息(如腫瘤細(xì)胞的異質(zhì)性、干細(xì)胞分化狀態(tài))積極。
稀有細(xì)胞檢測:可捕捉極低含量的稀有細(xì)胞(如循環(huán)腫瘤細(xì)胞CTCs大數據,含量低至1個(gè)/10^6個(gè)血細(xì)胞)。
4好宣講、定量分析精準(zhǔn)
熒光校準(zhǔn)與絕對計(jì)數(shù):通過標(biāo)準(zhǔn)微球建立熒光定量曲線連日來,結(jié)合已知濃度的計(jì)數(shù)微球,實(shí)現(xiàn)絕對定量分析(如HIV患者CD4+T細(xì)胞絕對計(jì)數(shù))不斷進步。
數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)化:確保不同實(shí)驗(yàn)批次間數(shù)據(jù)的可比性信息化技術,適用于科研和臨床診斷。
5認為、動(dòng)態(tài)檢測能力
實(shí)時(shí)追蹤細(xì)胞狀態(tài):結(jié)合實(shí)時(shí)信號采集系統(tǒng)責任製,可監(jiān)測細(xì)胞在藥物、細(xì)胞因子等刺激下的動(dòng)態(tài)響應(yīng)(如鈣流變化良好、膜電位波動(dòng))雙重提升。
動(dòng)力學(xué)研究:適用于研究細(xì)胞信號傳導(dǎo)通路(如T細(xì)胞受體激活后的Ca²+瞬時(shí)升高)或納米顆粒與細(xì)胞的相互作用。
6倍增效應、細(xì)胞分選功能
高純度分選:通過電荷偏轉(zhuǎn)技術(shù)結果,對目標(biāo)細(xì)胞施加電荷,使其偏離主液流進(jìn)入收集管重要意義,分選純度可達(dá)95%以上規則製定。
應(yīng)用場景:
基礎(chǔ)研究:分選特定干細(xì)胞(如CD34+造血干細(xì)胞)用于體外培養(yǎng)或移植研究。
臨床應(yīng)用:分選腫瘤細(xì)胞用于單細(xì)胞測序引領,解析基因突變譜表現明顯更佳。
7、非侵入性檢測
樣本適用性廣:可直接檢測新鮮組織懸液、血液技術先進、體液示範、培養(yǎng)細(xì)胞等,無需復(fù)雜預(yù)處理(如切片染色)數字化。
活細(xì)胞檢測:支持活細(xì)胞檢測(如細(xì)胞活性染料PI/Calcein-AM染色)新格局,保留細(xì)胞功能完整性,適用于干細(xì)胞研究開展攻關合作。
8特點、自動(dòng)化與標(biāo)準(zhǔn)化
智能操作:現(xiàn)代流式細(xì)胞儀配備自動(dòng)化軟件(如FlowJo、Cytobank)情況正常,支持一鍵式數(shù)據(jù)采集製度保障、分析及報(bào)告生成。
降低人為誤差:標(biāo)準(zhǔn)化操作流程(如QC微球校準(zhǔn)光路)提升實(shí)驗(yàn)重復(fù)性各領域,適合大規(guī)模臨床實(shí)驗(yàn)室使用模式。