一問題分析、BD流式細胞儀的檢測范圍
1.流式細胞儀可以檢測細胞結(jié)構(gòu)力量,包括:細胞大小重要的作用、細胞粒度兩個角度入手、細胞表面面積、核漿比例應用、DNA含量與細胞周期建議、R NA 含量、蛋白質(zhì)含量相貫通。
2.流式細胞儀可以檢測細胞功能不斷發展,包括:細胞表面/ 胞漿/ 核的特異性抗原、細胞活性自動化方案、細胞內(nèi)細胞因子緊密協作、酶活性、激素結(jié)合位點和細胞受體互動講。
二穩定性、BD流式細胞儀的臨床應用
1.流式細胞術(shù)在腫瘤學中的應用:流式細胞術(shù)可以檢測腫瘤細胞增殖周期像一棵樹、檢測腫瘤細胞表面標記過程中、癌基因表達產(chǎn)物、進行多藥耐藥性分析能運用、檢測凋亡;2.流式細胞術(shù)在血液學中的應用:檢測白血病和淋巴瘤細胞達到、活化血小板、造血干細胞(CD34+)計數(shù)不可缺少、白血病與淋巴瘤的免疫分型行業分類、網(wǎng)織紅細胞計數(shù)、細胞移植的交叉配型和免疫狀態(tài)監(jiān)測;3.流式細胞術(shù)在免疫學中的應用:可以進行淋巴細胞及其亞群分析、淋巴細胞免疫分型發展邏輯、檢測細胞因子凝聚力量。
三、BD流式細胞儀的科研應用
主要有細胞動力學功能研究聽得進、環(huán)境微生物分析新的力量、流式細胞術(shù)與分子生物學研究。
四便利性、流式細胞術(shù)常規(guī)檢測時的樣品制備
(一) 直接免疫熒光標記法
取一定量細胞(約1 × 106 細胞/ml )全面展示,直接加入連接有熒光素的抗體進行免疫標記反應(如做雙標或多標染色,可把幾種標記有不同熒光素的抗體同時加入)深刻認識,孵育20-60分鐘后核心技術,用PBS(pH7.2 - 7.4)洗1-2 次,加入緩沖液重懸主動性,上機檢測創造性。本方法操作簡便,結(jié)果準確體系,易于分析保障性,適用于同一細胞群多參數(shù)同時測定。雖然直標抗體試劑成本較高責任製,但減少了間接標記法中較強的非特異熒光的干擾十分落實,因此更適用于臨床標本的檢測。
(二) 間接免疫熒光標記法
取一定量的細胞懸液(約1X106 細胞/ml )規則製定,先加入特異的*抗體製造業,待反應*后洗去未結(jié)合抗體,再加入熒光標記的第二抗體關規定,生成抗原-抗體-抗抗體復合物發展基礎,以FCM檢測其上標記的熒光素被激發(fā)后發(fā)出的熒光。本方法費用較低建強保護,二抗應用廣泛同期,多用于科研標本的檢測。但由于二抗一般為多克隆抗體使命責任,特異性較差效果,非特異性熒光背景較強,易影響實驗結(jié)果情況較常見。所以標本制備時應加入陰性或陽性對照可持續。
另外,由于間標法步驟較多體製,增加了細胞的丟失構建,不適用測定細胞數(shù)較少的標本創新科技。