將標記有熒光素的Taqman探針與模板DNA混合后情況，完成高溫變性過程中，低溫復性，適溫延伸的熱循環(huán)有所提升，并遵守聚合酶鏈反應規(guī)律重要的作用，與模板DNA互補配對的Taqman探針被切斷資料，熒光素游離于反應體系中，在特定光激發(fā)下發(fā)出熒光重要的意義，隨著循環(huán)次數的增加集成，被擴增的目的基因片段呈指數規(guī)律增長，通過實時檢測與之對應的隨擴增而變化熒光信號強度深刻認識，求得Ct值首要任務，同時利用數個已知模板濃度的標準品作對照，即可得出待測標本目的基因的拷貝數。

　　Ct值（Cyclethreshold深入實施，循環(huán)閾值）的含義為：每個反應管內的熒光信號到達設定閾值時所經歷的循環(huán)數應用提升。

　　1. 熒光閾值（threshold）的設定

　　PCR反應的前15個循環(huán)的熒光信號作為熒光本底信號，熒光閾值的缺蕵I務指導。J）設置是3-15個循環(huán)的熒光信號的標準偏差的10倍新品技，即：threshold= 10*SDcycle 3-15

　　2. Ct值與起始模板的關系

　　每個模板的Ct值與該模板的起始拷貝數的對數存在線性關系，公式如下創造性。

　　Ct=-1/lg(1+Ex)*lgX0+lgN/lg(1+Ex)

　　n為擴增反應的循環(huán)次數保持穩定，X0為初始模板量，Ex為擴增效率能力，N為熒光擴增信號達到閾值強度時擴增產物的量。

　　起始拷貝數越多，Ct值越小長足發展。利用已知起始拷貝數的標準品可作出標準曲線紮實做，其中橫坐標代表起始拷貝數的對數，縱坐標代Ct值規模設備。因此支撐作用，只要獲得未知樣品的Ct值，即可從標準曲線上計算出該樣品的起始拷貝數領先水平。